Soluções tampão são líquidos à base de água que incluem um ácido fraco e sua base conjugada. Devido à sua química, as soluções tampão podem manter o pH (acidez) em um nível quase constante, mesmo quando mudanças químicas estão ocorrendo. Os sistemas de buffer ocorrem na natureza, mas também são extremamente úteis em química.
Usos para soluções de buffer
Nos sistemas orgânicos, as soluções tampão naturais mantêm o pH em um nível consistente, possibilitando que reações bioquímicas ocorram sem prejudicar o organismo. Quando os biólogos estudam processos biológicos, eles devem manter o mesmo pH consistente; para isso, usaram soluções tampão preparadas. As soluções tampão foram descritas pela primeira vez em 1966; muitos dos mesmos buffers são usados hoje.
Para ser útil, os buffers biológicos devem atender a vários critérios. Especificamente, eles devem ser solúveis em água, mas não solúveis em solventes orgânicos. Eles não devem ser capazes de passar através das membranas celulares. Além disso, eles devem ser não tóxicos, inertes e estáveis ao longo de todas as experiências para as quais são usados.
As soluções tampão ocorrem naturalmente no plasma sanguíneo, razão pela qual o sangue mantém um pH consistente entre 7,35 e 7,45. As soluções de buffer também são usadas em:
- processos de fermentação
- tecidos moribundos
- análises químicas
- calibração de medidores de pH
- Extração de DNA
O que é a solução Tris Buffer?
Tris é a abreviação de tris (hidroximetil) aminometano, um composto químico que é frequentemente usado em solução salina porque é isotônico e não tóxico. Por possuir um Tris com um pKa de 8,1 e um nível de pH entre 7 e 9, as soluções tampão Tris também são comumente usadas em uma variedade de análises e procedimentos químicos, incluindo extração de DNA. É importante saber que o pH na solução tampão tris muda com a temperatura da solução.
Como preparar o buffer Tris
É fácil encontrar uma solução tampão tris disponível no mercado, mas é possível fazer você mesmo o equipamento apropriado.
Materiais:
Calcule a quantidade de cada item necessário com base na concentração molar da solução desejada e na quantidade de tampão necessária.
- tris (hidroximetil) aminometano
- água desionizada destilada
- HCl
Procedimento:
- Comece determinando qual concentração (molaridade) e volume do buffer Tris que você deseja criar. Por exemplo, a solução tampão Tris usada para solução salina varia de 10 a 100 mM. Depois de ter decidido o que está fazendo, calcule o número de mols de Tris necessários, multiplicando a concentração molar de buffer pelo volume do buffer que está sendo produzido. (moles de Tris = mol / L x L)
- Em seguida, determine quantos gramas de Tris isso é multiplicando o número de mols pelo peso molecular de Tris (121,14 g / mol). gramas de Tris = (moles) x (121,14 g / mol)
- Dissolva o Tris na água destilada deionizada, 1/3 a 1/2 do volume final desejado.
- Misture em HCl (por exemplo, 1M HCl) até o medidor de pH fornece o pH desejado para sua solução tampão Tris.
- Dilua o tampão com água para atingir o volume final desejado de solução.
Depois de preparada, a solução pode ser armazenada por meses em local estéril à temperatura ambiente. A longa vida útil da solução tampão Tris é possível porque a solução não contém nenhuma proteína.