Etapas simples para fazer tampão de citrato de sódio

O tampão citrato de sódio é freqüentemente usado para isolamento de RNA, porque minimiza a hidrólise básica das cadeias de RNA, tornando-o inestimável para a purificação de mRNA durante genômico pesquisa e para estudar a transcrição. Os tampões à base de citrato também ajudam na detecção de antígenos em preparações fixas de tecidos, porque quebram as ligações cruzadas formadas entre os antígenos e o meio de fixação.

Com as etapas fáceis a seguir, é possível criar um tampão de citrato de sódio com um pH de 6 (ácido) em menos de 10 minutos.

Poucos materiais são necessários para fazer o tampão de citrato de sódio. Com o ácido cítrico, é necessário apenas 1 M de hidróxido de sódio, água destilada e uma sonda de pH calibrada. O citrato de sódio é opcional.

A preparação do tampão também requer um cilindro graduado de 1 litro, um balão volumétrico de 1 litro e três garrafas de mídia de 1 litro. Finalmente, você precisará de uma barra de agitação magnética e um agitador magnético. Todos esses materiais podem ser encontrados na escola,

Existem dois métodos para fazer tampões de citrato de sódio, dependendo dos materiais acessíveis a você.

1. Se você tiver ácido cítrico e a base conjugada, crie uma solução-mãe para cada uma delas misturando 21 gramas de ácido cítrico em 1 litro de água destilada e 29,4 gramas de citrato de sódio em 1 litro de água destilada água.
2. Se você tiver apenas ácido cítrico na mão, misture 2,1 gramas em pouco menos de 1 litro de água destilada.

Misture 82 mililitros da solução de ácido cítrico com 18 mililitros da solução de citrato de sódio. Para isso, adicione água destilada suficiente para reduzir ligeiramente o volume da mistura a menos de 1 litro.

Enquanto agita suavemente a solução com um agitador magnético, use hidróxido de sódio 1M para ajustar o pH da mistura para 6,0. Em seguida, com um balão volumétrico, adicione mais água destilada para elevar o volume total final da solução até exatamente 1 litro.